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T4 RNA连接酶II(截短型)图片
产品货号:
WH0164
中文名称:
T4 RNA连接酶II(截短型)
英文名称:
T4 RNA Ligase 2,Truncated
产品规格:
500U
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
T4 RNA连接酶II(截短型)可特异性催化5'-P腺苷化的DNA或RNA与RNA的3'-OH连接。本产品不需ATP来发挥活性,但需要供体底物的5'-P腺苷化。通过对野生型蛋白的截短改造,使得本产品失去了对非腺苷化5'-P的DNA或RNA与RNA3'羟基的连接活性,因此,如果供体5'-P进行腺苷化修饰,那么应用本产品可特异性的将其连接到受体RNA的3'端,从而可最大限度的减少非目标连接产物的背景。本产品通过大肠杆菌重组表达。包含野生型蛋白的N端249个氨基酸残基,分子量约为30.5kDa。本制品浓度为5U/μl。

产品特点:
·特异的催化5'-P腺苷化的DNA或RNA与RNA 3'-OH的高效连接,背景更低;
·蛋白比活性高,稳定性好。

产品组成:
组成WH0164
T4 RNA Ligase 2,Truncated500U
10×T4 RNA Ligase 2,Truncated Buffer1.5ml

储存条件:-25℃~-15℃保存。

贮存液成分:10mM Tris-HCl,100mM NaCl,0.1mM EDTA,0.1mM DTT,50%甘油。

适用范围:
1.在二代测序( NGS )应用中,主要用于miRNA文库构建中RNA的3'端接头的连接。
2.5'-P腺苷化的DNA或者RNA标签与任何种类RNA的3'端连接。

单位定义:
在1×T4 RNA Ligase 2,Truncated Buffer反应液中,20μl反应体系下,37℃,30min内使0.4μg等摩尔比的5'FAM标记的17nt单链RNA与5'腺苷化的18 nt单链DNA连接50%时,所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

质量控制:
性质描述
蛋白纯度>99%
酶活性30,000U/mg
单链核酸外切酶50 U酶中,<5.0%
双链核酸外切酶50 U酶中,<1.0%
双链核酸内切酶50 U酶中,未检出
宿主基因组污染50 U酶中,<10拷贝
非特异性RNase残留50 U酶中,未检出


使用方法:
在NGS文库构建过程中,一般按终浓度0.05~0.25 U/μl的量加入T4 RNA连接酶2(截短型)。也可根据实验具体情况来调整用量。
反应条件:25℃,60 min。
灭活条件:65℃,20 min。
相关搜索:T4 RNA连接酶II(截短型)T4 RNA Ligase 2,Truncated
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